技能一覧 › 高校生物 遺伝情報とその発現(知識)

PCR 法と電気泳動

PCR 法の 1 サイクルの過程(熱変性・プライマーの結合・耐熱性 DNA ポリメラーゼによる伸長)と、電気泳動で DNA 断片が長さによって分かれること(短いものほど速く移動する)について、正しい記述を選べる

前提

この技能までの道筋(40 技能)
算数中学高校大学大学院

読み込み中…

右端(太枠)がこの技能です。左へドラッグすると、さらに前の前提をさかのぼれます。技能を押すと、そこまでの道筋が光ります。

一覧で見る(前提が先)
  1. 実験器具の使い方と安全 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  2. 気体の発生方法・性質・集め方 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  3. 有機物・無機物と金属の性質 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  4. 原子・分子と化学式 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  5. 原子の構造と同位体 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  6. 電子配置と価電子 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  7. 周期表と周期律 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  8. イオン化エネルギー・電子親和力・電気陰性度 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  9. イオンと電離・電解質 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  10. イオン結合と金属結合 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  11. 共有結合と配位結合 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  12. 分子の形と極性 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  13. 分子間力と沸点 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  14. 結晶の種類と性質 (高校化学 物質の構成と化学結合(知識))
  15. 水溶液の性質と再結晶 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  16. 溶解のしくみ(水和)と極性による溶けやすさ (高校化学 溶液の性質(知識))
  17. 有機化合物の特徴と官能基による分類 (高校化学 有機化合物(知識))
  18. 構造異性体 (高校化学 有機化合物(知識))
  19. 脂肪族炭化水素の置換反応・付加反応・付加重合 (高校化学 有機化合物(知識))
  20. 分解と化合(化学変化の種類) (中学理科 化学分野の用語と知識)
  21. 酸化と還元 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  22. 酸化・還元の定義 (高校化学 酸化還元と電池・電気分解(知識))
  23. アルコールとエーテル (高校化学 有機化合物(知識))
  24. 酸化数と酸化・還元の判定 (高校化学 酸化還元と電池・電気分解(知識))
  25. 酸化剤と還元剤 (高校化学 酸化還元と電池・電気分解(知識))
  26. アルデヒドとケトン (高校化学 有機化合物(知識))
  27. 酸・アルカリと中和・指示薬 (中学理科 化学分野の用語と知識)
  28. アレニウスとブレンステッド・ローリーの酸・塩基の定義 (高校化学 酸と塩基(知識))
  29. 酸・塩基の価数・強弱と電離度 (高校化学 酸と塩基(知識))
  30. 弱酸の遊離・揮発性の酸の遊離 (高校化学 酸と塩基(知識))
  31. カルボン酸とエステル (高校化学 有機化合物(知識))
  32. 高分子化合物の特徴と重合の種類 (高校化学 高分子化合物(知識))
  33. 細胞のつくり (中学理科 生物分野の用語と知識)
  34. 植物のからだのつくり (中学理科 生物分野の用語と知識)
  35. 細胞分裂と生物のふえ方 (中学理科 生物分野の用語と知識)
  36. 動物の分類 (中学理科 生物分野の用語と知識)
  37. 遺伝の規則性と進化 (中学理科 生物分野の用語と知識)
  38. 核酸(DNA・RNA)の構成と構造 (高校化学 高分子化合物(知識))
  39. DNA の構造と相補性 (高校生物 遺伝情報とその発現(知識))
  40. DNA の複製のしくみ (高校生物 遺伝情報とその発現(知識))

説明

PCR 法(ポリメラーゼ連鎖反応法)は、DNA の中の特定の領域だけを、試験管の中で短時間に大量に増やす方法です。電気泳動は、DNA 断片を寒天(アガロース)のゲルの中で電圧をかけて移動させ、長さによって分ける方法です。この 2 つを組み合わせると、目的の DNA 断片が増えたかどうか、その長さはどのくらいかを調べられます。この技能では、PCR 法の 1 サイクルで起こることと、電気泳動で DNA が分かれるしくみについて、正しい記述を選べるようになります。

なぜそうしてよいのか

PCR 法は、細胞の中で起こる DNA の複製を、温度の上げ下げで試験管の中に再現したものです。DNA の複製では、まず 2 本鎖がほどけ、それぞれの鎖を鋳型にして DNA ポリメラーゼが新しい鎖を 方向に伸ばします。ただし DNA ポリメラーゼは、何もないところから鎖を作り始めることはできず、鋳型に結合した短い鎖(プライマー)の 末端に続けてヌクレオチドをつないでいきます。PCR 法ではこの性質を利用し、増やしたい領域の両端に相補的に結合する 2 種類の短い 1 本鎖 DNA をプライマーとして加えます。こうすると、2 つのプライマーにはさまれた領域だけがくり返し複製されます。

1 サイクルは 3 つの段階からなります。①約 95 ℃に加熱して、相補的な塩基どうしの水素結合を切り、2 本鎖 DNA を 1 本鎖に分ける(熱変性)。②約 55〜60 ℃に下げて、プライマーを鋳型の 1 本鎖の相補的な部分に結合させる(アニーリング)。③約 72 ℃にして、DNA ポリメラーゼにプライマーの 末端から新しい鎖を伸ばさせる(伸長)。95 ℃にくり返しさらされても失活しないように、高温の環境にすむ細菌などから得た耐熱性 DNA ポリメラーゼを使います。1 サイクルで鋳型となる 2 本鎖 DNA が 2 倍になるので、サイクルをくり返すと目的の領域が倍々に増えていきます。

電気泳動で DNA が動くのは、DNA のヌクレオチドに含まれるリン酸の部分が水溶液中で負の電荷を帯びているからです。そのため、電圧をかけると DNA は陽極(+極)に向かって移動します。ゲルは細かい網目のようなつくりをしていて、長い DNA ほど網目にひっかかって動きにくく、短い DNA ほど速く遠くまで移動します。こうして、DNA 断片が長さの順に分かれます。長さのわかっている DNA 断片(マーカー)を同時に流しておけば、その位置と比べて試料の DNA 断片の長さを推定できます。

手順

  1. PCR 法の記述では、まず 3 つの段階の順序と温度を確かめる:熱変性(約 95 ℃)→ プライマーの結合(約 55〜60 ℃)→ 伸長(約 72 ℃)

  2. 各段階で何が起こるかを確かめる:熱変性では水素結合が切れて 1 本鎖になる、プライマーの結合では相補的な部分にプライマーが結合する、伸長では DNA ポリメラーゼがプライマーの 末端から 方向に鎖を伸ばす

  3. 使う材料を確かめる:鋳型 DNA、2 種類のプライマー、4 種類のヌクレオチド、耐熱性 DNA ポリメラーゼ。ふつうの DNA ポリメラーゼでは、熱変性のたびに失活してしまう

  4. 電気泳動の記述では、DNA が負の電荷をもち陽極(+極)へ移動することを確かめる

  5. 移動距離と長さの関係を確かめる:短い DNA 断片ほど速く、遠くまで移動する。長さのわかったマーカーと比べて長さを推定する

例題

PCR 法と電気泳動について述べた文として正しいものを、次のア〜エのうちから 1 つ選べ。

ア PCR 法では、約 95 ℃に加熱することで、DNA ポリメラーゼがプライマーの 末端から新しい鎖を伸ばす。
イ PCR 法では、高温で処理しても失活しにくい耐熱性の DNA ポリメラーゼが用いられる。
ウ 電気泳動では、DNA は正の電荷をもつので、陰極(-極)に向かって移動する。
エ 電気泳動では、長い DNA 断片ほど速く移動し、陽極の近くまで達する。

例題の解答

手順 1・2:PCR 法の段階の順序と内容を確かめる。約 95 ℃では、相補的な塩基の間の水素結合が切れて 2 本鎖が 1 本鎖に分かれる(熱変性)。DNA ポリメラーゼが鎖を伸ばすのは約 72 ℃の伸長の段階である。よって、アは誤り。

手順 3:PCR 法では熱変性のために何度も約 95 ℃に加熱するので、高温でも失活しにくい耐熱性 DNA ポリメラーゼを用いる。よって、イは正しい。

手順 4:DNA はリン酸の部分が負の電荷を帯びているので、陽極(+極)に向かって移動する。よって、ウは誤り。

手順 5:ゲルの網目の中では、短い DNA 断片ほど速く移動する。長い断片ほど遅く、陽極の近くまで達するのは短い断片である。よって、エは誤り。

以上より、正しいものはイである。

答え:

イ

よくある誤り

この説明は AI が書き、別の AI が例題を独立に解いて答えを確かめ、説明を一歩ずつ査読しました。

入口の問題

この技能の次に学べること