増幅したい領域をもつ 2 本鎖 DNA が 分子含まれる溶液を用いて、PCR 法を サイクル行った。1 サイクルごとに、増幅したい領域の 2 本鎖 DNA の分子数はちょうど 2 倍になるものとする。 サイクル後に、増幅したい領域の 2 本鎖 DNA は何分子になるか。
PCR 法による DNA の増幅量
1 サイクルごとに 2 本鎖 DNA が 2 倍になることから、 サイクル後の DNA 分子数()を求められる
前提
- 指数の拡張と指数関数 (数学II 指数関数と対数関数)
- PCR 法と電気泳動 (高校生物 遺伝情報とその発現(知識))
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- PCR 法と電気泳動 (高校生物 遺伝情報とその発現(知識))
説明
PCR 法では、1 サイクルごとに 2 本鎖 DNA の数が 2 倍になります。このことを使うと、はじめにあった DNA の分子数 とサイクル数 から、 サイクル後の DNA 分子数を として求められます。逆に、増えた量からサイクル数や最初の分子数を求めることもできます。
なぜそうしてよいのか
前提で学んだように、PCR 法の 1 サイクルでは、まず加熱して 2 本鎖 DNA を 1 本ずつの鎖に分け(熱変性)、温度を下げてそれぞれの鎖にプライマーを結合させ、耐熱性 DNA ポリメラーゼが新しい鎖を伸ばします(伸長)。1 本の鎖を鋳型にして 2 本鎖が 1 つでき、もとの 2 本鎖には鎖が 2 本あるので、1 サイクルで 2 本鎖 DNA 1 分子が 2 分子になります。これは DNA の半保存的複製と同じしくみです。
どの 2 本鎖 DNA も同じように 2 倍になるので、サイクルを重ねるたびに分子数は 2 倍、2 倍…と増えます。 分子から始めると、1 サイクル後 、2 サイクル後 となり、 サイクル後は
です。1 回ごとに「足す」のではなく「かける」ので、少しのサイクル数でも急激に増えます。たとえば なので、10 サイクルでおよそ 1000 倍になります。
この式は、毎サイクルですべての DNA が正しく複製される(材料が十分にあり、反応がすべてうまくいく)という理想的な場合の値です。問題文でそのように仮定されているかを確かめて使います。
手順
はじめの 2 本鎖 DNA の分子数 とサイクル数 を読み取る(1 本鎖の数で与えられていたら 2 本鎖の数に直す)
1 サイクルで 2 本鎖 DNA が 2 倍になることから、増える倍率を とする
サイクル後の分子数を として計算する
サイクル数を求めるときは、 となる を探す(例: なら )
例題
ある 2 本鎖 DNA が 50 分子含まれる溶液を用いて PCR 法を行った。1 サイクルごとに、溶液中のすべての 2 本鎖 DNA が複製されて 2 倍になるものとする。10 サイクル後の 2 本鎖 DNA の分子数を求めよ。
例題の解答
手順 1:はじめの 2 本鎖 DNA は 分子、サイクル数は 。
手順 2:1 サイクルごとに 2 倍になるので、10 サイクルで 倍になる。
手順 3:10 サイクル後の分子数は
よって、51200 分子。
答え:
よくある誤り
1 サイクルごとに ずつ増えるとして や としてしまう誤り。正しくは、毎サイクル「2 倍」になるので 。、 なら ではなく
を や と取り違える誤り。正しくは、 は 2 を 回かけた数で、(、 ではない)
はじめの分子数をかけ忘れて だけを答えてしまう誤り。正しくは、 は増える「倍率」で、分子数は
1 本鎖の数と 2 本鎖の数を混同する誤り。正しくは、2 本鎖 DNA 分子には 1 本鎖が 本含まれるので、問われているのがどちらの数かを確かめる( サイクル後の 1 本鎖の数は )
この説明は AI が書き、別の AI が例題を独立に解いて答えを確かめ、説明を一歩ずつ査読しました。
入口の問題
この技能を使う問題
この技能の次に学べること
- PCR で目的領域だけの長さの DNA ができる数 (高校生物 遺伝情報とその発現)