遺伝情報とその発現の問題
長さ 塩基対の 2 本鎖 DNA 断片 Z を増幅するため、Z を 分子含む反応液を用意し、PCR 法を サイクル行った。PCR では、1 サイクルごとに 2 本鎖 DNA の数がちょうど 倍になり、得られる 2 本鎖 DNA はすべて Z と同じ塩基配列・同じ長さ( 塩基対)であるものとする。
次に、増幅で得られたすべての 2 本鎖 DNA を制限酵素 X で処理した。Z には X の切断部位が か所あり、Z の一方の末端(左端とする)からの距離は次の表のとおりである。X はすべての切断部位で完全に切断し、それ以外の場所では切断しないものとする。
| 切断部位 | 左端からの距離 |
|---|---|
| 1 | 塩基対 |
| 2 | 塩基対 |
| 3 | 塩基対 |
切断後の DNA 断片をすべてアガロースゲル電気泳動で分離した。電気泳動では断片は長さだけで分かれ、同じ長さの断片は 本のバンドとして、長さが異なる断片は別のバンドとして検出されるものとする。
制限酵素処理後に反応液中に存在する 2 本鎖 DNA 断片の総数と、電気泳動で検出されるバンドの本数を、この順に求めよ。
この問題で使うもの
- PCR 法による DNA の増幅量(説明と入口の問題)
- 制限酵素の切断と電気泳動のバンド(説明と入口の問題)
この問題を解けるようになるまで(60 技能)
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ヒント
行き詰まったら、上から順に 1 つずつ開いてください。
ヒント 1
まず PCR で 2 本鎖 DNA が何分子になったかを求め、次に 1 分子が切断されて何個の断片になるか、その長さはいくつかを考えましょう。
ヒント 2
1 サイクルで 2 倍になるので サイクル後は 倍です。直鎖状 DNA を か所で切ると断片は 個になります。バンドの数は断片の『長さの種類の数』です。
ヒント 3
サイクル後の DNA は 分子です。1 分子からできる断片の長さは左から 、、、 塩基対です。
答えと解説
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解説を読む
PCR による増幅量
1 サイクルごとに 2 本鎖 DNA の数が 倍になるので、 サイクル後の数は、はじめの 分子の 倍である。
1 分子あたりの断片
直鎖状の DNA を か所で切断すると、断片は 個できる。それぞれの長さは
- 左端〜切断部位 1: 塩基対
- 切断部位 1〜2: 塩基対
- 切断部位 2〜3: 塩基対
- 切断部位 3〜右端: 塩基対
(確認:)
断片の総数
分子それぞれから 個の断片ができるので
バンドの本数
断片の長さは 、、 塩基対の 種類である( 塩基対の断片は 1 分子から 2 個できるが、長さが同じなので同じ位置に泳動され 本のバンドになる)。分子の数が増えてもできる断片の長さの種類は変わらないので、バンドは 本である。
よって、答えは である。
別解
PCR を 5 サイクル行うと 2 本鎖 DNA は 倍になる。最初に Z が 3 分子あるので、増幅後の 2 本鎖 DNA は 分子である。
1 分子の Z は 3 か所で切断されるので、 個の断片になる。長さは 、、、 塩基対である。
断片の総数は 本である。
断片の長さは 塩基対で、異なる長さは の 3 種類である。同じ長さの断片は 1 本のバンドになるので、バンドは 3 本である。
検算: で、Z の全長と一致する。長さ 300 の断片は 1 分子あたり 2 個あるので、 本が 1 本のバンドにまとまる。
答え:断片の総数 、バンドの本数 。