遺伝情報とその発現の問題
窒素源として だけを含む培地で大腸菌を何世代も培養し、DNA に含まれる窒素をすべて にした。この大腸菌を、窒素源として だけを含む培地に移して培養を続けた。ある時点で一部の大腸菌から DNA を抽出し、塩化セシウム溶液を用いた密度勾配遠心法で分析した。その結果、DNA は次の 2 つのバンドだけに分かれた。
| バンド | DNA の量の比 |
|---|---|
| 中間の重さの DNA( の鎖と の鎖からなる) | |
| 軽い DNA(2 本の鎖がともに ) |
この時点の残りの大腸菌を、ただちに窒素源として だけを含む培地に移し、さらに 2 回分裂させたあと DNA を抽出した。このとき得られた DNA 全体のうち、重い DNA(2 本の鎖がともに )の占める割合を分数で求めよ。
ただし、DNA は半保存的に複製され、新しく合成される鎖には、そのとき培地に含まれる窒素だけが使われるものとする。また、すべての大腸菌は同調して分裂し、1 回の分裂ごとに DNA はちょうど 1 回複製されるものとする。DNA の量の比は DNA 分子の数の比に等しいとみなす。
この問題で使うもの
- 半保存的複製と世代ごとの DNA の割合(説明と入口の問題)
この問題を解けるようになるまで(43 技能)
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- 核酸(DNA・RNA)の構成と構造
- DNA の構造と相補性
- DNA の複製のしくみ
- 半保存的複製と世代ごとの DNA の割合
ヒント
行き詰まったら、上から順に 1 つずつ開いてください。
ヒント 1
まず、中間の DNA と軽い DNA の比 から、 培地で何回分裂したかを求めよう。もとの の鎖は何本残り続けるかに注目する。
ヒント 2
培地で 回分裂すると、もとの 1 分子あたり DNA は 分子で、中間の DNA は常に 2 分子。 を解く。その後 培地では、新しい鎖がすべて になることを使って、重い・中間・軽い DNA がそれぞれ何になるかを追う。
ヒント 3
なので、 培地に移す直前は中間 2 分子・軽い 30 分子。 培地で 1 回分裂すると重い 2 分子・中間 62 分子・軽い 0 分子になる。もう 1 回分裂させたときの重い DNA の数を数えよう。
答えと解説
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解説を読む
1. 培地で何回分裂したかを求める
はじめの重い DNA 1 分子に注目する。半保存的複製では、もとの の 2 本の鎖は分かれてそれぞれ別の DNA 分子に受け継がれ、その後も分解されずに残る。したがって、 培地で 回分裂すると、DNA 分子は 個になり、そのうち中間の重さの DNA は常に 個、残りの 個は軽い DNA である。
中間 : 軽い なので
よって、 培地で 5 回分裂したことがわかる。このとき、もとの 1 分子あたり DNA は 分子で、中間の重さの DNA が 分子、軽い DNA が 分子である。
2. 培地での 1 回目の分裂
新しく合成される鎖はすべて になる。
- 中間の重さの DNA( 鎖 + 鎖)1 分子 → 重い DNA 1 分子 + 中間の DNA 1 分子
- 軽い DNA( 鎖 2 本)1 分子 → 中間の DNA 2 分子
よって、中間 分子からは重い ・中間 、軽い 分子からは中間 ができ、
3. 培地での 2 回目の分裂
- 重い DNA 1 分子 → 重い DNA 2 分子
- 中間の DNA 1 分子 → 重い DNA 1 分子 + 中間の DNA 1 分子
よって
(確認: の鎖は 5 回分裂後に 本あり、その後は新しく作られないので、 鎖を含む中間の DNA は 分子。残り 分子が重い DNA となり一致する。)
4. 割合
別解
【ステップ1: 移した時点までの分裂回数】
培地で 回分裂したとき、DNA 分子は全部で 個。そのうち中間の重さの DNA は、最初の 鎖を 1 本ずつ持つ 2 個だけで、残りの 個が軽い DNA。
中間:軽い = 2 : = 1 : 15 より 、。
よって移した時点では DNA 32 分子のうち、中間 2 分子、軽い 30 分子。
【ステップ2: 培地で 2 回複製】
・軽い DNA(N/N)1 分子: 1 回目の複製で中間 2 分子。2 回目の複製で、各中間 DNA は中間 1 分子と重い 1 分子になる。結果、4 分子のうち中間 2、重い 2。
・中間 DNA(N/N)1 分子: 1 回目の複製で中間 1 分子と重い 1 分子。2 回目の複製で、中間 DNA は中間 1 と重い 1、重い DNA は重い 2 になる。結果、4 分子のうち重い 3、中間 1。
【ステップ3: 集計】
全 DNA 分子は 個。
重い DNA は 個。
割合は 。
【検算】
鎖の総数は、移した時点で 2 本(中間 DNA 2 分子に 1 本ずつ)。2 回の複製後に新しくできた鎖は で、その数は ではなく、総鎖数 256 から古い 鎖 本を引いた 194 本。これに元の 鎖 2 本を加えると 鎖は 196 本。 鎖は 62 本で、すべて別々の中間 DNA に入っているので中間 DNA は 62 分子。軽い DNA は 0 分子。重い DNA は 分子。これは上の結果と一致する。